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Cultura das células estromais da medula óssea num meio suplementado com os nutrientes N2: implicações sobre a geração de células neurais

L. Castillo-Díaz, K. de la Cuétara-Bernal, A.Y. García-Varona   Revista 40(02)Fecha de publicación 16/01/2005 ● OriginalLecturas 1814 ● Descargas 359 Castellano English Português

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[REV NEUROL 2005;40:69-73] PMID: 15712157 DOI: https://doi.org/10.33588/rn.4002.2003479

Introdução. A maioria dos sistemas de cultivo para a manutenção in vitro e a diferenciação neural das células estromais da medula óssea (CEM) utilizam meios sintéticos suplementados com soro fetal bovino (SFB) a 10 ou 20%. Contudo, o soro é composto por quantidades desconhecidas de substâncias não definidas que podem interferir no efeito de substâncias exógenas sobre a diferenciação neural destas células. Objectivo. Neste trabalho descrevemos a sobrevivência das CEM em condições de cultura onde se reduziu a concentração do SFB a 0,5% e 1%, com a utilização da fórmula N2 de Bottenstein e Sato (1979) e um substrato tratado com poli-L-lisina (PLL). Materiais e métodos. Células estromais isoladas dos fémures de rato foram cultivadas no meio de Eagle modificado por Dulbecco que continham SFB a 10, 1 0,5% ou em meio livre de soro contendo a fórmula N2. Nas culturas crescidos em meios livres de soro ou com baixa concentração deste, a superfície da cultura foi tratada com PLL. A sobrevivência celular foi mediada pelo método de MTT ou por recontagem das células vivas.

Resultados. A sobrevivência das CEM cultivadas na Fórmula N2 diminuiu até aproximadamente 40% da observada no meio SFB a 10% e afectou a morfologia celular. Um aumento significativo da sobrevivência respeito á cultura em N2 verificou-se quando, para além deste nutriente, se adicionou SFB 0,5 e 1%. Nas culturas semeadas sobre superfícies tratadas com PLL a sobrevivência celular aumentou comparativamente aos seus homólogos cultivados sobre superfícies não tratadas. Conclusões. Este sistema de cultura que combina a fórmula N2 com SFB a 1% e semeia sobre um substrato tratado com PLL, adequa-se para a manutenção dos CEM. Estas condições são vantajosas para estudar a diferenciação neural destas células, já que reduzem a interferência do soro. Discute-se o possível envolvimento deste sistema de cultura para os estudos de diferenciação neural nestas células.

Células estromais da medula óssea Cultura de células Sobrevivência Soro fetal bovino

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